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如何正确使用荧光定量PCR十二联管?
根据您对荧光定量PCR技术的专业背景,我为您整理了使用带有光学平盖的荧光定量PCR十二联管的正确方法。以下是关键步骤和注意事项:
耗材选择
材质:选择医疗级聚丙烯(PP)材质的十二联管,确保惰性和热稳定性。
颜色:推荐使用白色或磨砂耗材,以提高荧光检测的灵敏度和数据一致性。
光学平盖:必须使用专为荧光定量PCR设计的光学平盖,普通圆盖不适用。

加样与密封
加样:在超净工作台中进行,避免污染。加样后需离心去除管壁液滴和气泡。
封膜:使用光学膜密封反应孔。正确的封膜方法是先沿纵向压膜,再横向压膜,最后沿板边缘按压确保密封。
上机操作
放置位置:将十二联管对称放置在加热块上,优先放在第6列或第7列,再向两边扩展,确保受热均匀。
程序设置:在PCR仪软件中设置热循环程序,并选择在退火或延伸步骤进行荧光采集。
注意事项
避免重复使用:十二联管为一次性耗材,不可清洗或重复使用,以免引入误差。
仪器匹配:根据PCR仪的荧光信号采集方式选择透明或白色耗材。
希望这些信息能帮助您顺利完成实验!如果您需要更详细的程序设置或数据分析方法,可以进一步说明。
注:本试剂盒仅供科研使用,不用于临床诊断。具体操作请以实际试剂盒说明书为准。
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